Q：12204ES、12907ES 和 12609ES 区别与联系？

A：12204 为完整的建库试剂盒，包含片段化模块，连接模块，扩增模块。12609 为片段化模块，可同时进行样本的片段化，末端修复/加A流程。12907 为单酶（原料酶），仅用于DNA 片段化。

Q：12907里面的酶是什么酶？能否作用于RNA?产生的片段末端是平末端还是黏性末端？

A：是一些随机内切酶，作用于dsDNA，产生的末端是黏性末端。

Q：产品使用时能否用单酶搭配机械法流程建库试剂盒，如 12907+12199?

A：可以。实际使用时我们建议购买完整试剂盒（Cat#12204）,该试剂盒经过流程的优化可获得优异的建库表现。如果想要购买 12907 搭配其他品牌建库试剂盒，建议片段化之后先进行纯化再接其他品牌建库试剂盒。

Q：酶切模块可否适用 MGI 平台？

A：片段化酶切模块 12907可通用于各类平台

Q：gDNA 片段化参考说明书酶切条件酶切 20 min，竟然切不动？

A：一般优先考虑 DNA 的质量问题，比如 Input DNA 中引入高浓度金属离子螯合剂或其他盐离子，可能会影响酶切效果，建议将DNA 稀释在 ddH2O 或不含EDTA 的 10 mM Tris Buffer (pH 7.5-8.0)中再进行片段化。其次，如果样本是反转录得到的全长cDNA，则需考虑样本纯度问题。另外，对于环状DNA 的酶切，需要另行摸索酶切时间体系。特殊样本可考虑磁珠纯化之后进行酶切或适当延长酶切时间。

Q：酶切时间也不长，竟然过度酶切了?

A：以插入片段 300 bp 为例，白细胞 gDNA，30 度酶切 10min，出现如下图过度酶切现象。建议参考酶切条件需要考虑不同样本gDNA 大小，如白细胞gDNA 较小，应适当缩短酶切时间，否则易出现过度酶切现象。

Q：最低可以切到多小片段？

A：有小片段保护机制，最低可到150bp左右。

[1] Zhang S, Pei Z, Lei C, et al. Detection of cryptic balanced chromosomal rearrangements using high-resolution optical genome mapping [published online ahead of print, 2022 Jun 16]. J Med Genet. 2022;jmedgenet-2022-108553. doi:10.1136/jmedgenet-2022-108553(IF:6.318)

[2] Ren J, Zhang R, Pan C, et al. Prevalence and genotype-phenotype correlations of GBA-related Parkinson disease in a large Chinese cohort. Eur J Neurol. 2022;29(4):1017-1024. doi:10.1111/ene.15230(IF:6.089)