Hieff Unicon® Pure Pro U+ qPCR Mix(One Tube)是一款采用公司新一代抗体法热启动Taq酶的荧光定量预混液,适用于DNA模板多重qPCR扩增体系,采用Yesean特殊控菌体系,能在一定程度上去除产品中的宿主(大肠杆菌)和环境中混入的背景菌(如铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、人源基因组)DNA污染。本产品通用性好,且支持快速程序和全预混形式。在DNA多重扩增应用场景中具备以下特点:(1)试剂通用性好,搭配多数引探进行扩增都具有优秀的扩增性能;(2)支持引物探针提前预混,全预混试剂37℃加速14天后扩增性能保持不变;(3)支持快速程序,检测时间≤35min;(4)2×Mix预混液试剂添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,提高了试剂多重扩增的灵敏度和特异性。(5)本产品采用dUTP/UDG防污染体系,dUTP代替dTTP,有效防止气溶胶污染的风险,保证检测结果的准确性。
(1)试剂通用性好,搭配多数引探进行扩增都具有优秀的扩增性能;
(2)支持引物探针提前预混,全预混试剂37℃加速14天后扩增性能保持不变;
(3)支持快速程序,检测时间≤35min;
(4)2×Mix预混液试剂添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,提高了试剂多重扩增的灵敏度和特异性。
(5)本产品采用dUTP/UDG防污染体系,dUTP代替dTTP,有效防止气溶胶污染的风险,保证检测结果的准确性。
1、超低背景菌残留
基于试剂背景菌残留水平考察,使用翌圣超低残留通用全预混qPCR预混液(Cat#16713ES)和常规试剂(无残留控制)在大肠杆菌(E.coli)体系下进行NTC扩增,16713ES同时在铜绿及人源基因组DNA双体系下进行NTC扩增,结果表明:Cat#16713ES在48孔NTC中均无检出,试剂中背景DNA(大肠、铜绿和人源)残留量极低。
2、优异的全预混稳定性
基于全预混试剂稳定性考察,对Cat#16713ES分别进行三种方式处理(4℃、37℃以及冻融)。实验组于4℃、37℃分别处理7天,冻融50次,与对照组(-20℃保存)在4组多重扩增体系(组1、组2及组4为4重扩增体系,组3为3重扩增体系)下进行稳定性测评,且部分扩增组增加了37℃加速14天的稳定性测评。结果表明,实验组与对照组试剂的Ct值偏差(△Ct值)在±0.5以内,荧光值偏差在15%以内,翌圣全预混试剂具有优秀的多重扩增稳定性能。
-25~-15℃保存,有效期1年。