Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase基于Pyrococcus Furiosis DNA Polymerase,经基因工程改造而成。该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的83倍,是普通Pfu DNA聚合酶的9倍。酶溶液中添加了常温可抑制聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性的两种单克隆抗体,可简便地进行高特异性的Hot Start PCR,极大提高了扩增的检出率和产物的特异性。酶溶液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力,扩增目的片段的长度可长达13 kb。本产品配备了优化缓冲液,使得该酶适用于复杂模板的扩增。扩增产物为平末端。
产品组分
组分编号 | 组分名称 | 10153ES10 (10 U) | 10153ES60 (100 U) | 10153ES76 (500 U) | 10153ES80 (1,000 U) |
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10153-A | Hieff Canace® Plus High-Fidelity DNA Polymerase (1 U/μL) | 10 μL | 100 μL | 500 μL | 500 μL×2 |
10153-B | 2×Canace® Plus PCR buffer(含Mg2+,dNTPs) | 300 μL | 3×1 mL | 15×1 mL | 30×1 mL |
10153-C | 6×DNA Loading Buffer | 120 μL | 1 mL | 6×1 ml | 12×1 ml |
- 超高保真:保真性是Taq酶的83倍;
- 特异性强:热启动酶提高反应的特异性,目的条带单一;
- 扩增速度快:30 sec/kb,最快10 sec/kb;
- 灵敏度高:可扩增低至1 pg模板;
- 稳定性好:常温保存7d,反复冻融50次,不影响产品性能;
- 操作方便:可室温融化和加样;
- 对比竞品,具有更优异的扩增性能与产量
图. 分别采用Hieff Canace® Plus高保真酶(Cat#10154ES)、10149ES和市售高保真酶(竞品1、竞品2)对不同模板进行PCR扩增,结果10154ES与10149ES扩增性能优异,产量高,特异性好。M:1 kb DNA Marker。
扩增速度快,极限扩增速度低至10 sec/kb
图. Hieff Canace® Plus高保真酶分别扩增水稻gDNA 2 kb片段和小鼠gDNA 4 kb片段。不同延伸速度(1-60 sec/kb)进行扩增,极限延伸速度为10 sec/kb。M:1 kb DNA Marker。
- 灵敏度高,可扩增低至1 pg模板
图. Hieff Canace® Plus高保真酶扩增质粒500 bp片段,不同模板量(1 pg-0.5 μg)均可有效扩增,灵敏度低至1 pg。NC:阴性对照。M:100 bp DNA Marker。
冰袋运输。-20°C保存。有效期1年。
Q:不同模板的推荐使用量是多少?
A:基因组DNA:50–200 ng(扩增1–10 kb片段);质粒/病毒DNA:10 pg–20 ng;cDNA:1–2.5 μL(不超过总反应体积的1/10)
Q:预混液反复冻融会影响性能吗?
A:产品含特异保护剂,反复冻融后仍能保持稳定活性,但仍建议分装保存以减少冻融次数。